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黄牛人工授精技术是由几个关键技术环节组成的系统性较强的一套综合技术。提高黄牛冷配受胎率就需要把相关的技术合理配套应用,各相关技术间有着紧密的的联系,某环节的技术出现问题,都会不同程度地影响受胎率。现结合笔者多年实践经验,对配套技术中各环节技术要点分述如下。
1 检查冻精的质量
冻精的质量是决定冷配成败的关键。因此,供精单位要以诚为本,在冻精生产、分发、运输过程中必须保证冻精质量,确保精子活力在0.3以上,不合格的冻精不下发。输精技术人员在输精过程中要严格按有关操作规程进行,最大程度保证精子活力不受外界或人为影响,对解冻后的精液要实行镜检,观察3~5个视野,2~3个层面,呈直线前进的精子必须占总数的30%(即活力0.3)以上的方可使用,必须确保有效精子数达到1500~2000万个以上,才能正常达到体内受精,活力低于0.3的精液坚决不予使用。
2 适宜和输精时间确定
发情母牛有如下表现时,可考虑进行第一次输精。 2.1 母牛由乱跑鸣叫变为安静,不躲避人的接触。 2.2 手抓牛尾有拱背现象。 2.3 阴门流出的粘液量不再增多,粘液中间混有灰白色或米黄色不透明的块状或小颗粒状粘液。 2.4 发情后期试情公牛仍尾随发情母牛,但母牛拒绝爬跨,发情行为开始消失,肿胀的外阴部开始消退,阴门两侧互有粘贴感,粘膜由潮红色变为粉红色或粉白色。 2.5 从明显发情表现如爬跨、哞叫、流稀薄粘液等开始,过24h或母牛拒绝爬跨后6~12h。 2.6 直肠检查子宫颈充血肿胀度已下降,宫外口稍硬,内口较软。 2.7 直肠检查卵泡体积不再增大,壁变薄张力增强,波动明显,有一触即破之感。 2.8 用手指插入阴道后,母牛尾高举,阴户收缩,呈排尿姿势并立即排尿。 2.9 在第一次输精后,过8~12h再进行第二次输精。 2.10 在实践中,清晨5:00~6:00和傍晚17:00~18:00输精受胎率较高。母牛排卵多发生在性欲消失后4~20h内,夜间排卵比白天多,约占70%以上。 2.11 在实践中,不可能十分准确掌握排卵规律,通常采用一个情期输两次精的方法。第一次在早上,则第二次在傍晚;如第一次在傍晚,则第二次在次日早上。同时应根据“老配早,少配晚,不老不少配中间”的经验,灵活选择适宜的输精时间。
3 选择恰当的输精部位
经验表明,以子宫基部输精受胎率为最高。双手配合把输精器前端引入子宫颈管内,接着再往里插,穿过2~4道皱褶样的螺旋状组织,就进入子宫体,即可把精液注在子宫体基部,如有把握确定一侧卵泡发育,可把精液深输入到发育侧,否则,还是输到子宫体基部为好,不论哪侧排卵都会有精子参与受精。
4 输精次数宜少不宜多
每个情期输两次为宜,如判断准确输一次便可受胎,每次输精量为颗粒用一粒,细管用一个为宜。必须保证解冻后精子活力在0.3以上。过多的输精次数一方面造成精液的浪费,另一方面会对牛产生过多的不良刺激,引起情期紊乱和子宫疾病感染机会增多。
5 输精过程中的消毒
5.1 输精器具的消毒 输精器用后要洗净,高温或煮沸消毒,一次一消毒,用前应预热到40℃,然后吸取精液或装入细管。用完之后立即用清水冲洗干净,消毒、烘干备用。也可用酒精消毒,待干燥后使用。 5.2 母牛外阴部的消毒 输精前要先清洗母牛外阴部,并擦干水渍。输精时最好把阴门开张,尽可能不让已消毒的输精器接触母牛外阴部,以减少子宫感染疾病的机会。 5.3 在实际操作过程中,由于器具和牛外阴部消毒不彻底而引起子宫疾病增多,降低精子活力和母牛受胎率的情况很常见,因此,消毒是不能马虎的。
6 冻精的解冻技术
在实际操作中,解冻的方法多样,如自然法、手搓法、冷水法、温水法等,笔者实践证明,用38~40℃的温水解冻最好,其精子活力比其他方法要高出0.1以上,解冻后不宜在温水中长时间浸泡,应在10~20s内拿出擦干,并在最短时间内完成输精。
7 输精的具体操作技术
7.1 检查器具是否消毒,有无损坏,确保安全有效输精。 7.2 解冻温水最好经煮沸后再用凉开水勾兑成38~40℃的温水,以保证细管不被污染,减少感染机会。 7.3 细管或颗粒取放要迅速,在罐外留存时间控制在5s内,尽量不把装精袋或冻精提筒拿到罐外,应在罐颈部下10cm为好,以防多次取精影响冻精质量。 7.4 解冻后检查细管有无破裂进水现象,如有进水应弃掉不用,同时看清牛号、日期并做好记录。 7.5 剪开细管时剪口要平齐,擦干水渍后装入输精器内,同时要对精液进行镜检,活力达不到0.3以上的坚决不用,确保受胎率。 7.6 输精前要掏空牛直肠内蓄粪,以利于触摸和把握子宫颈,消毒清洗牛外阴部,操作者一手入直肠把握子宫颈,一手持输精器。由助手或畜主分开阴门后,先向中斜入避开尿道口后再水平插入。此时直肠内的手可感觉到输精器的位置,两手配合把输精器插入子宫开口内。插入深度如前述的输精部位,稍把输精器往后拉一下,再推入精液,不要让输精器前头顶在子宫的某一部位而堵塞出精口,使精液推不出去造成倒流。本着“慢插、准确、适深、轻注、缓出”的原则进行输精操作。
8 输精时可能遇到的问题及时处理
8.1 直肠内抓不到子宫颈 这主要因为有的母牛子宫颈较深且下垂,通常的部位找不到。处理的方法可通过插入阴道的输精器指引找寻。 8.2 输精器不能顺利插入阴道 这多因为输精器干涩或误入尿道。或插入的方向不对,或母牛紧张阴道弯曲阻碍等引起,处理方法是,做好输精前母牛外阴部的清洗消毒,必要时可在输精器上涂润滑油。输精时避开尿道口中,插入输精器时要缓慢转动前进,不要硬插,以免损伤阴道。 8.3 输精器对不上子宫颈口 这主要是直肠内手把握子宫靠前,造成子宫颈口下垂,或阴道皱褶阻隔,阴道长且弯曲阻碍,输精器偏向子宫颈外围等造成。解决的方法是直肠握颈的手应把握子宫颈外口处,切勿过前,不然会造成子宫颈口呈游离状态而下弯。如因阴道皱褶挡住了插不进去,此时不要乱捅硬插,应将握子宫颈的手向前推,使阴道伸展拉直皱褶,两手配合便可顺利插入。如因输精器偏入子宫颈外围,应退回重新缓慢双手配合引导插入。当输精器插入子宫颈口时,可轻轻摇动,此时把握子宫颈的手可以感觉到是否真正插入子宫颈口内。 8.4 输精完毕后有精液残留 主要因为输精器前出口在阴道或子宫内被堵塞,或细管一端活塞闭密性差引起。处理方法是:注入精液时把输精器先向外拉一下,或向不同角度移动一下,避免被粘液或粘膜壁堵住,注精液时要慢,完毕后要检查有无精液残留,必要时应补输精液。如果是细管一端活塞闭密性差引起,应向生产场反映改进。
9 母牛屡配不孕的原因及治疗
9.1 引起屡配不孕的原因有生理性(先天性)和病理性两种。生理性主要有输卵管阻塞和子宫角闭锁,致使精子不能到达受精部位而导致屡配不孕;病理性主要有卵巢囊肿、卵巢炎和子宫炎,多因人工授精消毒不严,助产或胎衣剥离处理不当而引起。 9.2 生理性因素屡配不孕母牛多发生于未产过犊的母牛,其发情同期的排卵均正常。 9.3 病理性多见隐性子宫炎和化脓性子宫炎。隐性子宫炎表现发情周期多数正常,但粘液分泌增多,有时呈黄色水样,直检可感觉子宫角稍增粗。化脓性子宫炎表现发情周期不规律,常见阴道内流出呈乳状脓性泌物,发情或直检时可见脓性分泌物增多。直检感到子宫壁增厚,弹力减低,严重的子宫体呈囊状内有液体充盈。 9.4 治疗方法 生理性的应淘汰,病理性的根据不同情况治疗。 9.4.1 卵泡囊肿 可选用孕马血清1000~2000IU肌注,隔日1次,连用2次。孕酮500~1000mg一次肌注,隔日一次,连用3次。促黄体素200~400IU,肌注隔日或每日1次,连用2次。 9.4.2 隐性子宫炎 可用生理盐水在母牛发情后20小时左右冲洗子宫。排尽冲洗液后再和生理盐水兑青霉素160~240万IU,链霉素100万IU混合注入子宫内,过4~5小时再投服促孕一剂灵300~500g。用药后4~5小时进行第1次输精,隔8~10h再输一次。 9.4.3 化脓性子宫炎,可用0.1%高锰酸钾溶液冲洗子宫2~3次,当脓性分泌物减少后再用生理盐水,青霉素、链霉素混合冲洗子宫2~3次,待发情后用治疗隐性子宫炎的方法进行治疗和人工授精。只要方法得当,治疗及时,病理性不孕治愈率可达80%以上。
10 做好早期妊娠诊断,抓好复配,提高总体受胎率
母牛配种后的18~20d应进行妊娠检查,如确定没有妊娠,就应尽可能地找出原因,采取相应措施,及时补配。
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