高免血清“抗血清”制备和使用简易方法

 

 

一、制备高免血清，对母猪的选择

制备高免血清应选用近期有过典型临床表现且明显康复母猪：体质健壮，无特殊病原体感染，产仔6胎以上，年老、繁殖力下降，无种用价值的淘汰母猪首选。因猪场发病一般从母猪开始，而康复速度也以母猪最快，因此往往能用康复母猪的血清保护到大部分保育猪。

二、制备高免血清程序

1.采血

采血应在上午空腹时进行，禁食一夜，可避免血中出现乳糜而获得澄清的血清。将所选择母猪冲洗干净固定于“X”型的保定架上，仰卧保定，将猪尾一端垫高，左胸前口剃毛并用碘酒清洗，用酒精脱碘，等酒精挥发后，准备一空心铜管，一端尖、一端平，长40cm、直径约1cm，消毒、烘干后平的一端套硅橡胶管，经消毒的胸前口捅入猪的心脏（不要刺太深防止完全穿透心脏），放血。

消毒烘干好的容器（大离心瓶或500ml的注射用生理盐水瓶），将胶管的一头贴住瓶壁，血顺瓶壁留下，装约400-500ml（离心瓶依照仪器要求）。

3.取血清

离心法：400×4离心机按一般血液离心要求进行即可；自然析出：封好瓶口，冷却到室温，放入4度冰箱过夜，异日取出，取血清，另外装瓶、封口。

4.灭活

56度温箱中1.5小时（保证全瓶血清维持在56度时间至少1小时），自然冷却，加入抗生素（一般是双抗，具体剂量还要看各厂的实际情况），有条件可以对血清进行钴－60辐照消毒。将血清冷冻保存（随解冻随用，大约可以保存12周）。

5.血清的无菌检查

血清通过接种琼脂平板，温箱培养看是否有菌落生长，另外（双抗的量加多少可以通过培养情况来确定）

6.安全性实验

通过培养无细菌生长的血清注射小猪约10头（5日龄-10日龄）（腹腔注射），观察一周（每日量体温，观察是否发病）如发病务必确诊发病原因。

7.使用方法

肌肉注射：小猪2ml, 中大猪3-5ml, 母猪8ml。隔5日再注射一次。